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细胞培养配完培,只需扭一扭,摇一摇

作者:Cell Gao来源:公众号



细胞体外培养所需的完全培养基,配置前均需将其组份胎牛血清(FBS,液态)、双抗(可选择添加)从负20度冰箱拿出,放4度冰箱解冻过夜并室温恢复后,才能开始配置。其耗时长,操作较多,容易交叉污染。本次实验测试和体验的即用型完全培养基,由广州蕊特生物科技有限公司研制。其在基础培养基的瓶盖内,镶嵌有已定量的干粉状胎牛血清(含10%
FBS)和1X双抗。只需开盖后扭一扭,摇一摇,便可配置好完全培养基(文末可参与“摇一摇”体验,免费获得培养基。),具体配置操作请首页视频:

即用型完全培养基(干粉FBS)细胞增殖测试

---实验操作和数据分享


一、细胞增殖测试试剂材料、条件和方法:
a、目的细胞:

①单克隆高转染高滴度的人胚肾细胞(Mono-293TT-Gao),

②过表达CD40L/IL-2/IL4/IL-21/BAFF基因的小鼠胚胎成纤维细胞(NIH3T3-CD40L/IL-2/IL4/IL-21/BAFF),

③单克隆高滴度的人胚肾细胞株(293T-Gao),

④适合腺病毒包装扩增的人胚肾细胞(293A),

⑤小鼠腹腔巨噬细胞(RAW264.7)。

b、测试条件:
①常规含10% FBS(液态)的H-DMEM完培培养基,简称:10% FBS+H-DMEM培养基;
②含10% FBS(干粉状)的H-DMEM完培培养基,简称:10% FBS蕊特即用型培养基;
③使用H-DMEM基础培养基稀释的含5% FBS(液态)的H-DMEM培养基,简称:5% FBS蕊特即用型培养基;

④使用H-DMEM基础培养基稀释的含2.5% FBS(液态)的H-DMEM培养基,简称:2.5% FBS蕊特即用型培养基。
⑤使用干粉胎牛血清自行配置的H-DMEM完全培养基等。

c、细胞增殖测试方法:基于InCucyte实时动态活细胞成像法,非MTT或CCK-8法。

d、细胞数目:5K/Well for 96 Plate。

细胞增殖测试操作步骤:
由于293T系列的细胞贴壁不牢固,以换液方式换不同培养基时细胞大量脱落丢失,导致基础不一致,测试结果不可信。故,需按照“需采取先给药,再铺板(接种细胞)的方式”操作,具体操作步骤,请点击跳转细胞给药实验操作步骤【适合悬浮生长的细胞】。其他细胞,贴壁较牢,可以换液方式换不同培养基进行细胞增殖测试。

细胞增殖测试结果和数据解读(图2):
A、Mono-293TT-Gao细胞细胞生长增殖曲线

Mono-293TT-Gao细胞测试细胞增殖时间间隔照片(图3、4、5和6):

其他细胞测试数据分享:






D、Mono-293TT-Gao细胞增殖测试数据数据解读:

a、细胞培养0-48h内,各培养基组,细胞增殖无明显差异。

b、细胞培养48h-96h,含10% 、5%和2.5% FBS的蕊特即用型培养基,与10% FBS+H-DMEM培养基正常对照组比较,均能促进细胞生长增殖,差异较明显。

c、细胞培养96h以后,含10% 、5%和2.5% FBS的蕊特即用型培养基,与10% FBS+H-DMEM培养基正常对照组比较,均能促进细胞生长增殖,差异非常明显,且显著。

综上可见:含10% FBS的蕊特即用型培养基用于Mono-293TT-Gao细胞体外培养,促进细胞增殖的效果,明显优于常规的10% FBS+H-DMEM培养基。甚至将“含10% 的蕊特即用型培养基”,用H-DMEM基础培养基稀释4倍后(含2.5% FBS时),促进Mono-293TT-Gao细胞增殖能力也优于常规的10% FBS+H-DMEM培养基。这体现了干粉FBS的优越性,与我们使用干粉状FBS自行配置的培养基促进细胞增殖效果一致。
参与“摇一摇”体验活动的细则:

关注公众号后,请截图“即用型培养照片(有H-DMEM和1640两种,见下面照片)”,发给微信号:CytoBiotech-G。前50名的用户(按照微信收到信息的先后顺序计算),均可免费获得任意一款即用型完全培养基100ml。




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